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細菌室應(yīng)注意的一些事項
細菌室應(yīng)注意的一些事項【摘要】 從檢驗人員培訓(xùn)、消毒、工作態(tài)度、質(zhì)量控制、檢驗方案設(shè)計、使用抗菌藥物、菌種保存及廢棄物管理等幾個方面總結(jié)分析了臨床微生物檢驗注意的一些事項。
【關(guān)鍵詞】 臨床微生物; 檢驗; 問題; 措施
隨著醫(yī)學科學的迅速發(fā)展,超級細菌的出現(xiàn),細菌工作已引起人們的高度關(guān)注。筆者結(jié)合本醫(yī)院的實際情況, 對微生物實驗室的一些注意事項總結(jié)如下。
1加強院內(nèi)感染知識培訓(xùn)和自我防護培訓(xùn)內(nèi)容應(yīng)為職業(yè)道德教育,醫(yī)院感染管理的法律法規(guī),相關(guān)的規(guī)章制度和操作規(guī)程[1].醫(yī)院內(nèi)部患者聚集,因而是病原體高度集中的場所,某些醫(yī)院感染病原菌在潮濕環(huán)境中存活較久,進入易感患者體內(nèi),導(dǎo)致醫(yī)院感染,故定期對醫(yī)院的科室和病房做微生物監(jiān)測,可以及時發(fā)現(xiàn)傳染源,并制定預(yù)防感染和控制感染的措施。如反饋實驗室資料:微生物檢驗室應(yīng)每天對臨床各種標本進行耐藥譜匯總,并定期報告醫(yī)院感染控制部門,控制部門提供信息給臨床,以便臨床醫(yī)師了解醫(yī)院的主要流行病原菌及耐藥譜,加強合理使用抗生素;定期總計細菌藥敏試驗。醫(yī)院內(nèi)的感染監(jiān)測與控制工作與微生物檢驗室的水平密切相關(guān)故微生物檢驗工作者的專業(yè)素養(yǎng)應(yīng)得到訓(xùn)練與提高。應(yīng)提高檢驗工作者的理論素養(yǎng),并豐富感染性疾病診斷、治療方面的相關(guān)知識。應(yīng)調(diào)動檢驗工作者的積極主動性,在快速準確做好病原菌診斷的基礎(chǔ)上,及時與臨床進行有效溝通。檢驗工作者應(yīng)把醫(yī)院感染監(jiān)測工作當成自己的責任和使命,指導(dǎo)臨床實施科學的消毒和隔離,真正發(fā)揮微生物檢驗工作者在醫(yī)院感染控制工作中的重要作用。操作時戴帽子、口罩, 必要時穿隔離衣、膠鞋、戴手套, 隨時注意手的清潔、消毒。其人員應(yīng)進行定期健康體檢及必要的預(yù)防接種,增強自身抵抗力。
2做好消毒工作室內(nèi)定時通風、紫外線照射, 物體表面用消毒液擦拭, 嚴格劃分清潔區(qū)、半污染區(qū)、污染區(qū), 增加設(shè)施投入, 房間布局合理, 防止危險因素擴散, 每月進行室內(nèi)微生物學檢測。紫外線消毒具有比較多的優(yōu)勢,張璐曾在研究中指出其優(yōu)點:(1) 高效率殺菌性能: 紫外線一般在使用1——2 s 后對細菌、病毒的殺菌即可達到99%——99.9%的殺菌率; (2) 高效的廣譜性, 紫外線殺菌具有最高的光譜性非選擇性的, 在進行有效照射后, 它對幾乎所有的細菌、病毒等均達到高效率殺滅; (3) 無二次污染可能,在進行紫外線消毒殺菌過程中, 不添加任何化學藥劑, 純物理消毒, 因此沒有對周圍環(huán)境產(chǎn)生二次污染的可能性; (4) 紫外線殺菌設(shè)備簡單, 占用空間小, 運行維護費用低, 因此總投資較少, 成本低[2].
3檢驗人員的態(tài)度問題臨床微生物檢驗至今為止仍不能完全脫離手工,許多結(jié)果的判斷仍有賴于工作人員的主觀判斷。因此,檢驗人員的工作態(tài)度直接影響檢驗結(jié)果。臨床微生物檢驗涉及的環(huán)節(jié)較多,任何一個環(huán)節(jié)中細小的差錯,就有可能導(dǎo)致檢驗結(jié)果改變,甚至可能會誤導(dǎo)臨床治療。臨床微生物檢驗人員在日常工作中必須嚴格按照操作規(guī)范進行操作,時刻將每一位患者的安危系于心,牢記自己的工作職責。
4質(zhì)量控制要到位質(zhì)量控制(室內(nèi)、室間)是實驗室的支柱,從時間段來看,包括分析前、中、后,工作中注意細節(jié),就可以回顧性解決一些實際問題。堅持室內(nèi)質(zhì)量控制是做好室間質(zhì)量控制的前提, 室內(nèi)質(zhì)量控制項目應(yīng)包括標本采集、培養(yǎng)基、試劑、判斷血清、藥敏紙片等。如:采集的標本不合格, 這方面問題較多的是痰液和尿液標本, 對于痰液標本, 正確的留取方法是先讓患者用清水漱口3次, 然后囑其用力從氣管深部咳出痰液, 吐入無菌容器內(nèi)送檢。 而實際情況是很多醫(yī)院在采用自然咳痰法留取痰液標本時, 臨床醫(yī)生和護士不做必要的指導(dǎo), 直接讓患者留痰, 這樣得到的痰標本常常造成氣管、 咽喉及口腔常居菌的嚴重污染, 有的可能根本沒有痰液成分, 這樣結(jié)果常導(dǎo)致致病菌和常居菌混淆, 造成誤檢誤報。 對于尿液標本, 應(yīng)根據(jù)檢驗?zāi)康倪x擇不同的采集方法, 如疑為尿道炎或做衣原體培養(yǎng)檢查, 應(yīng)取前段尿3——4ml; 如懷疑為膀胱炎或腎炎, 多采用中段尿采集法; 為進一步確定菌尿是否來自腎臟, 可用導(dǎo)尿管采集腎盂尿。如做厭氧培養(yǎng), 需采用膀胱穿刺采集法。 而結(jié)核分枝桿菌的集菌檢查要留取24h尿液, 自然沉淀或加40%明礬形成沉淀后取沉淀送檢。標本質(zhì)量的另一問題是采集時間, 常規(guī)要求應(yīng)在疾病的早期、 急性期、 癥狀典型時和用藥之前采集標本, 對于已用藥的患者應(yīng)停藥3天后采集標本; 不能停藥的, 應(yīng)在下次用藥之前采集,而且需將標本接種在含有藥物中和劑的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。選擇購買理想的成品培養(yǎng)基,知名大公司的生化反應(yīng)管及進口藥敏紙片;對于較難鑒定的菌種, 必要時對一些生化反應(yīng)多做幾次, 以達到正確鑒定的目的;參考資料非常重要,要求做到全新, 要經(jīng)常不斷地更新知識, 接受新信息, 從本質(zhì)上提高解決疑難問題的能力。而參加細菌學室間質(zhì)評活動, 則是對實驗室的工作水平作出的綜合判斷, 也是對實驗室內(nèi)質(zhì)量控制的檢驗, 對于提高細菌鑒定水平, 獲取有關(guān)微生物學的新資料、新方法、新信息、發(fā)現(xiàn)和分析細菌檢驗工作中的錯誤原因, 進而可以提高細菌檢驗水平和工作質(zhì)量。
5檢驗方案的設(shè)計在臨床微生物檢驗中, 檢驗方案的設(shè)計是非常重要的, 它直接影響到檢出率的高低。 如結(jié)核桿菌形態(tài)學檢查中使用的染色法, 有人對比研究熒光染色法和萋-尼氏抗酸染色法, 結(jié)果熒光染色法檢出陽性率56.9%,萋-尼氏抗酸染色法檢出陽性率39.5%, 兩者差異有顯著性(P<0.01)。在培養(yǎng)檢查上, 培養(yǎng)基選擇和標本的前處理對目的菌的檢出很重要。 對尿、 痰等臨床標本進行必要的前處理可除去污染的雜菌, 進而明顯提高陽性檢出率,比如用生理鹽水清洗痰液。 在培養(yǎng)基的使用上, 常規(guī)培養(yǎng)使用的培養(yǎng)基種類有限, 有些目的菌因成分的抑制而在所用的培養(yǎng)基中不生長。 比如, 對腹瀉患者取糞便分離培養(yǎng)時, 常規(guī)所用的是伊紅美蘭瓊脂和SS瓊脂平板。 腸桿菌科細菌能被選擇出來, 但弧菌科有些細菌 (如副溶血性弧菌) 因其嗜鹽性在這兩種培養(yǎng)基上多不生長。 如果對這類細菌仍用常規(guī)培養(yǎng)基分離培養(yǎng), 其結(jié)果自然是造成漏檢。
6合理使用抗菌藥物 細菌室人員在藥敏試驗時, 對病原菌耐藥性變遷起到監(jiān)控作用, 通過對病原菌耐藥性的總結(jié)和分析, 可獲得病原菌耐藥性變化的資料, 并改變目前病原學診斷。細菌培養(yǎng)時間較長不能適應(yīng)臨床的現(xiàn)狀,應(yīng)盡快提高細菌快速診斷的水平。根據(jù)病原菌種類及細菌的藥敏試驗結(jié)果, 合理選用抗菌藥物, 給臨床提供指導(dǎo), 避免臨床盲目用藥, 控制耐藥菌株的產(chǎn)生, 減輕患者經(jīng)濟負擔, 防止醫(yī)院感染的發(fā)生。
7做好菌種保存與管理[3]收集、保存與管理菌種, 是微生物實驗室檢驗工作中一項重要內(nèi)容。尤其是計量認證實施后, 實驗室的工作都要程序化、規(guī)范化, 對菌種的保存和管理也提出了更嚴格的要求, 收集、保存與管理好菌種, 對提高微生物檢驗工作的質(zhì)量至關(guān)重要。對一般細菌的保存, 如大腸桿菌、葡萄球菌、綠膿桿菌等直接接種普通瓊脂斜面, 35℃培養(yǎng)18——24h后, 放入4℃冰箱, 可保存1——2 個月。 對白色念珠菌的保存: 一般采用沙保羅氏瓊脂斜面, 28℃培養(yǎng)48——72h后, 放入4℃冰箱, 可保存2——3個月。對烈性細菌的保存: 如霍亂弧菌等, 應(yīng)該采取及時送上級單位, 若暫時未能上送的菌種應(yīng)有專人保管。保存菌種的安全問題, 應(yīng)專門制定一個菌種保管程序性文件, 明確職責,健全菌種檔案, 認真作好登記, 統(tǒng)一編號, 按規(guī)定條件保存,以備用。實驗完畢后, 要及時銷毀菌株, 并做好記錄,嚴防病原菌外泄、污染。
8做好廢棄物管理一次性醫(yī)療用品、器具用后消毒、毀形、焚燒, 專人管理無害化處理, 并進行登記。
【參考文獻】
1葉應(yīng)嫵,王毓三。全國臨床檢驗操作規(guī)程。南京: 東南大學出版社,1991: 399-400.
2張璐。 關(guān)于紫外線筷子消毒機消毒效果的評價。 山西醫(yī)藥雜志, 2009, 38 (9): 820.
3陳秀英。菌種保存方法的比較。中國衛(wèi)生檢驗雜志, 2002,12(2):231.
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